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Nonostante i numerosi studi, le origini di Ostia sono ancora poco note. Lo storico annalista Ennio (239-169 a.C.) scrive: "Dopo che Anco Marzio salì al trono, dove il Tevere si getta con la sua corrente nel mare salmastro, fu fondata Ostia" (Annales, II, 84-86).
Anche lo storico Tito Livio, che scrive sotto Augusto, attribuisce la fondazione della città al quarto re di Roma, Anco Marzio, vissuto nella seconda metà del VII secolo a.C.: "E non solo la città si ingrandì sotto questo re, ma anche il suo territorio (...). Il dominio romano fu esteso fino al mare e alla foce del Tevere fu fondata la città di Ostia; nei pressi furono impiantate le saline (Libro I, 33, 9).
Tuttavia non sono state rinvenute tracce della città in epoca regia. Alcuni studiosi ne mettono persino in dubbio l'esistenza; altri affermano che doveva trovarsi al di sotto di quella attuale. Interessante è l'ipotesi del Prof. Barbieri, il quale sostiene che Ostia di epoca regia doveva affacciarsi sulla riva settentrionale dello stagno in prossimità delle saline.
